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A aluna do curso de Engenharia Sanitária e Ambiental, da Universidade Federal de Mato Grosso (UFMT), Elisângela Machado Corrêa está realizando na estação de tratamento de esgoto – ETE Lagoa Encantada, da Companhia de Saneamento da Capital (Sanecap) importante pesquisa como trabalho de conclusão de curso, com o objetivo de caracterização gênica de Escherichia coli isoladas do efluente da Estação de Tratamento de Esgotos dos córregos do Caju, no bairro CPA III, em Cuiabá.

A pesquisadora informa que a caracterização gênica das culturas de Escherichia coli que foram isoladas do efluente da ETE - Lagoa Encantada, onde se encontra localizado o Centro de Referência de Reuso de Água e o Córrego do Caju, foi estudada por técnicas tradicionais de cultivo e por análises moleculares.

As Culturas de Escherichia coli de três pontos amostrais das lagoas são equivalentes ao período de coletas se deu entre os meses de Julho à Setembro de 2010. “Foram isoladas das análises de colimetria realizadas pelo método enzimático cromogênico/fluorogênico”, informou Corrêa.

Para as análises de biologia molecular, as culturas positivas de Escherichia coli foram confirmadas pela produção de fluorescência quando submetidas à luz ultra-violeta na cartela aluminizada e transferidas para tubos contendo meio Caldo Nutriente (CN). A confirmação da pureza das colônias foi feita a partir do isolamento e caracterização morfotintorial pelo método de Gram. Como resultados das 425 amostras de Escherichia coli, 12% foram selecionadas por meio de sorteio para realização da extração de DNA e identificação gênica das estirpes, explicitou a professora doutora Zoraidy Marques de Lima, orientadora do trabalho, do Departamento de Engenharia Sanitária da Universidade Federal de Mato Grosso (UFMT).

As estirpes selecionadas foram caracterizadas por meio do método do BOX-PCR por duas diferentes condições de corrida visando à obtenção de um melhor resultado na amplificação do DNA bacteriano. As imagens foram eletronicamente rearranjadas para uma melhor visualização e comparação dos perfis de BOX-PCR sendo a similaridade entre as amostras determinada por matrizes binárias de presença e ausência para cada um dos pontos de análise, em função da posição que as bandas ocupavam no gel, observou o professor doutor Eduardo Beraldo de Morais, um dos professores examinadores.

A partir da matriz de dissimilaridade e posterior agrupamento por UPGMA foi gerado o percentual de similaridade entre os isolados de cada ponto. Perfis com 70% de similaridade nos dendrogramas, considerando uma tolerância de 2% foram considerados semelhantes, disse a professora examinadora doutora Selma Baia Batista.

No presente estudo, foi possível obter uma boa qualidade e quantidade de DNA extraído das estirpes bacterianas e amplificação da PCR. Por meio dos dendogramas de dissimilaridade, notou-se que 96% dos isolados obtiveram uma similaridade acima de 70% o que leva a inferir que 4% dos isolados de Escherichia coli sejam de sorotipos diferentes, concluiu Corrêa.

O projeto CRRA do Centro de Referência de Reuso de Água  - CRRA -, desenvolvido pelo Instituto de Desenvolvimento de Programas - IDEP -, UFMT e SANECAP -, com patrocínio da PETROBRAS, por meio do Programa Petrobras Ambiental do Governo Federal, tem como local de atuação a ETE - CPA III - Lagoa Encantada, área revitalizada, em Cuiabá-MT, implantada em 2009.

O CRRA é um sério e disciplinado de pesquisa que tem como objetivo integrar e apoiar as ações de extensão, ensino e pesquisa dos parceiros envolvidos no Grupo “Amigos da Lagoa”, a partir da gestão do reuso de efluente, que será usado para minimizar os impactos ambientais nos corpos hídricos receptores, desenvolvendo atividades de piscicultura, fertirrigação de viveiros, bem como, o aproveitamento e reuso de águas pluviais, promovendo a sensibilização e mobilização da comunidade do entorno da Lagoa Encantada.